1. 将细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中,取样计数,取1×10?个细胞至1.5mL Ep管中,1500rpm,离心5min。
2. 弃上清,取90μL MaxSortin® 细胞分选缓冲液重悬,加入10μL MaxSortin® TCR αβ分选磁珠,混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。
3. 取MaxSortin® L型分离柱放入MACS分选器(130-090-976)上,用1mL细胞分选缓冲液润洗两次。
4. 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出,加入1mL细胞分选缓冲液,1500rpm,5min离心,弃上清。
5. 加入1mL细胞分选缓冲液重悬,将样品加入L型分离柱中,待其自然流出后,分两次加入细胞分选缓冲液,每次加3mL,15mL管收集流出液。
6. 计数并进行流式检测。
1.磁珠与细胞孵育时需要 混匀,以提高分选效率。
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