细胞冻存
以下操作以脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）的冻存为例简述细胞冻存液的操作方法，hUC-MSCs 的培养推荐使用无血清培养基培养（ExcellBio，ME000-N015）。
1. 将生长状态良好的 hUC-MSCs，用重组胰蛋白酶消化 2min，用胰蛋白酶抑制剂终止消化，重悬细胞，300g 离心 5 分钟，弃上清;
提示：对于悬浮培养细胞，可直接离心收集细胞。
2. 加入适当体积的 PBS 重悬细胞，细胞计数，计算细胞总量；
3. 再次以 300g 离心 5min 收集细胞，弃上清；
4. 根据冻存密度需要，添加适量 Optivitro® 无蛋白，CD 细胞冻存液，反复吹吸 4-5 次使细胞分散均匀，重悬细胞；
提示：冻存密度可根据需要调整，贴壁细胞冻存密度推荐0.5-5×106 /mL，悬浮细胞如CHO 等推荐
0.1-2×107 /mL。
5. 将细胞悬液转移至冻存管内，旋紧管盖，做好标记；
6. 将冻存管放入程序降温盒（Excellbio，CS041-0001）内，转移至-80℃冰箱过夜（或储存 6h 以上）；
7. 将细胞冻存管从-80℃冰箱内取出，迅速转移至-196℃液氮或气象罐中长期保存；
提示：对于较长期保存细胞，建议每5-10 年复苏鉴定细胞状态。
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