RPMI 1640 培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果，是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。RPMI 1640 培养基含有生物素、维生素 B12 以及 PABA，这些成分是 Eagle's MEM 和 DMEM 所不具备的。此外，该培养基之中还含有高浓度的维生素肌醇和胆碱。含有 GlutaMAX™ 添加剂的 RPMI 1640 培养基具有易于使用的包装形式，可显著减少有毒氨的积累，并改善细胞活力和生长情况。RPMI 1640 培养基不含蛋白质、脂质或生长因子。因此，RPMI 1640 培养基需要添加剂，通常采用 10% 胎牛血清 (FBS)。RPMI 1640 培养基使用碳酸氢钠缓冲体系 (2.0 g/L)，因此需要 5–10% CO2 的环境来维持生理 pH 值。

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