使用 BD Pharmingen™ MonoBlock™ 白细胞染色缓冲液对细胞进行多色免疫荧光表面染色的方案

用于对外周血单核细胞（PBMC）或从淋巴组织制备的大量红细胞裂解的全血或细胞样品进行染色的方案1。

一个。首先将 10 μL BD Pharmingen™ MonoBlock™ 白细胞染色缓冲液添加到每个染色管或板微孔中，然后加入荧光抗体或抗体混合物并小心涡旋。

b.将 100 μL 含有悬浮的人或小鼠白细胞（例如，在 ~10^6 个细胞）中加入每个试管或微孔中，并小心地涡旋。

或者：可以先向每个试管或微孔中加入 10 μL BD Pharmingen™ MonoBlock™ 白细胞染色缓冲液和 100 μL 含有悬浮白细胞，并小心地涡旋。然后将荧光抗体或抗体混合物加入细胞和封闭缓冲液的混合物中。

c. 将悬浮细胞在室温 （RT） 下孵育（30 分钟），对于人细胞，在 4°C 下孵育避光（小鼠细胞）。

d. 孵育后，用BD Pharmingen™染色缓冲液（FBS）[Cat.第 554656 号]。

e.将细胞重悬于 500 μL BD 法明根™染色缓冲液 （FBS） 中进行流式细胞术分析。

人全血染色方案2

一个。首先向每个染色管中加入 10 μL BD Pharmingen™ MonoBlock™ 白细胞染色缓冲液，然后加入荧光抗体或抗体混合物并小心地涡旋。

b.加入 100 μL 人全血。

或者：可以先将 10 μL BD Pharmingen™ 单体白™细胞染色缓冲液和 100 μL 含有悬浮人全血加入每个试管或微孔中，并小心地涡旋。然后将荧光抗体或抗体混合物加入细胞和封闭缓冲液的混合物中。

c. 将悬浮的细胞在避光的室温 （RT） 下孵育（30 分钟）。

d. 孵育后，用BD Pharm裂解裂™解缓冲液（Cat.No. 555899）或BD FACS™裂解液（Cat.第 349202 号）。

e.用BD Pharmingen™染色缓冲液（FBS）[Cat.第 554656 号]。

f.将细胞重悬于 500 μL BD 法明根™染色缓冲液 （FBS） 中进行流式细胞术分析。

协议说明：

? 对于人白细胞，通过用BD Pharmingen™ Human BD Fc模块™（Cat.编号 564219/564220）。

? 对于小鼠白细胞，通过将细胞与BD Pharmingen™纯化大鼠抗小鼠CD16/CD32抗体（小鼠BD Fc阻滞™）[Cat.第 553141/553142 号]。

? BD Pharmingen™ MonoBlock™ 白细胞染色缓冲液与 BD Horizon™ Brilliant 染色缓冲液（Cat.No. 566349 563749）和BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer plus（Cat.第 566385 568264 号）。数据未显示，但可根据要求提供。