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为了 限度地减少交叉反应，驴抗小鼠 IgG 全抗体已交叉吸附来自牛、山羊、鸡、豚鼠、仓鼠、马、羊、兔、大鼠和人类的 IgG。交叉吸附或预吸附是提高抗体特异性的纯化步骤，从而减少背景染色和交叉反应性。二抗溶液通过柱基质，该柱基质含有来自潜在交叉反应物种的固定化血清蛋白。只有非特异性结合的二抗被捕获在色谱柱中，高度特异性的二抗流过。进一步通过额外的色谱柱，产生高度交叉吸附的二抗制备物。这些额外步骤的好处在与其他一抗存在潜在交叉反应的多重/多色染色实验或可能存在内源性免疫球蛋白的组织/细胞荧光染色实验中显而易见。

使用偶联液：使用前将蛋白质偶联液在微量离心机中短暂离心;仅将上清液添加到实验中。此步骤将有助于消除储存过程中可能形成的任何蛋白质聚集体，从而减少非特异性背景染色。由于染色方案因应用而异，因此应根据

经验确定抗体的适当稀释度特异性：该抗体与小鼠 IgG 上的重链和所有小鼠免疫球蛋白上的轻链结合。该抗体不结合来自牛、鸡、山羊、豚鼠、仓鼠、马、人、兔、大鼠或绵羊的非免疫球蛋白小鼠血清蛋白或 IgG。