货号:555899

品牌：BD

规格:100毫升

产品描述

BD红细胞裂解液是一种缓冲的浓缩（10X）氯化铵基裂解试剂。当稀释至1X浓度并按推荐使用时，BD Pharm Lyse™在单克隆抗体染色后裂解红细胞。当通过流式细胞术分析时，裂解溶液可导致淋巴细胞和红细胞碎片的良好光散射分离。BD Pharm Lyse™不含固定剂，因此白细胞在红细胞裂解后仍然存活。

制备和储存

1X裂解液的制备：用蒸馏水1：10稀释10X浓缩液。1X溶液的pH值应在pH 7.1-7.4范围内。如有必要，调整pH值。使用前将1X溶液加热至室温。100ml的10X浓缩物将产生一定量的1X溶液，足以裂解500个样品。

裂解程序：

注意：以下程序仅适用于人全血红细胞裂解。由于应用各不相同，对于其他样品，例如小鼠pi脏红细胞裂解（在37°C下裂解孵育时间长达3分钟），骨sui红细胞裂解，每个研究者应优化条件以获得 结果。

1.向每根含有高达200μl全血加单克隆抗体混合物的管中加入2.0ml 1X裂解液。

2.加入裂解液后立即轻轻涡旋每根管。

3.在室温下孵育，避光，15分钟。

4.离心机200×g，离心5分钟。

5.小心地吸出超级乳腺，不要干扰沉淀。

6.加入2.0毫升1X PBS，含有1%热灭活胎牛血清和0.1%叠氮化钠（PBS-FBS）。

7.以200×g离心5分钟。

8.小心地吸出超级乳腺，不要干扰颗粒。

9.将沉淀重悬于0.5ml PBS-FBS或固定剂（例如2%甲醛）中以进行流式细胞术分析。

故障排除：

不完全裂解可能由于以下几个原因而发生：（1）标本的年龄可能影响红细胞裂解，（2）1X裂解液可能尚未加热到室温，或（3）加入裂解液后，样品可能没有充分涡旋。如果发生不完全裂解（通过最终洗涤的细胞悬浮液中存在过量的可见红细胞来识别），则重复裂解过程。但是，不建议裂解两次以上。